Polyplus通用型DNA/siRNA轉染試劑jetPRIME?(101000046)

jetPRIME transfection reagent

貨號：101000046   1.5 mL;

101000027   0.1 mL

品牌：Polyplus 

產品簡介：

jetPRIME?是一種功能強大、用途廣泛的DNA和siRNA轉染試劑，用于日常實驗，可產生高效可靠的科學結果。jetPRIME?可確保在各種粘附細胞中實現(xiàn)高DNA轉染效率和優(yōu)異的基因沉默。jetPRIME?也是DNA/siRNA共轉染或幾種質粒共遞送的理想選擇。此外，Polyplus的jetPRIME?試劑對細胞非常溫和，因為它在轉染過程中需要少量的試劑和核酸。

一、卓越的轉染效率

jetPRIME?是一種用于日常實驗的強大轉染試劑。它導致不同來源的轉染粘附細胞系以及原代細胞的比例異常高。對于幾種常用的細胞系，與頂級競爭對手的試劑相比，jetPRIME?試劑獲得了70%至90%的優(yōu)異轉染效率（圖1和圖2）。

圖1 jetPRIME與其主要競爭對手的轉染效率比較。在24孔板中轉染后24小時，通過FACS分析在各種細胞系中評估轉染效率。根據制造商對Lipofectamine?2000和jetPRIME?的建議使用條件。

圖2:jetPRIME?與Lipofectamine?3000的轉染效率比較。在96孔板或24孔板中轉染后24小時，通過FACS分析在各種細胞系中評估轉染效率。根據制造商對lipofectamine?3000和jetPRIME?的建議使用條件。

二、成本效益：更少的DNA和更少的試劑

jetPRIME?是一種高效的體外轉染試劑，需要少量試劑和質粒DNA，使用成本效益非常高（表1）。

表1 推薦使用條件。根據制造商的建議，用于轉染的6孔板中每個孔的DNA和試劑（jetPRIME?和競爭對手）的量。

除了降低成本外，使用更少的DNA還可以最大限度地減少轉染引發(fā)的不良細胞毒性作用。因此，jetPRIME?是高轉染效率和優(yōu)異細胞活力的首選試劑。

三、更好的細胞活力

jetPRIME?在轉染過程中對細胞極為溫和，可提高細胞活力并改善轉染結果。用jetPRIME?轉染的細胞是健康的，而用競爭對手觀察到主要的細胞毒性（圖3）。

圖3 轉染后24小時細胞活力。根據制造商對每種試劑的建議進行轉染后24小時HeLa細胞的相位對比顯微鏡檢查。

四、易于使用的protocol

jetPRIME?是一種易于使用的轉染試劑（圖4）：

快速方便地放大和縮??；

與血清和抗生素兼容。

圖4 jetPRIME? protocol。DNA、siRNA以及DNA和siRNA共轉染的方便方案。

產品應用：

一、質粒轉染

jetPRIME?可導致不同來源的轉染粘附細胞系以及原代細胞的百分比顯著較高（表1）。

表1 使用jetPRIME?的各種細胞類型的轉染效率。轉染后24小時通過FACS分析測定GFP陽性細胞的百分比。

質粒是常見于細菌中的環(huán)狀DNA小分子。質粒與染色體DNA分開存在和復制，在細菌中，質粒通常攜帶有利于細菌生存的基因。質粒可以被有意地引入所需的細胞中，并用于在特定細胞系中過表達感興趣的基因。這種過程被稱為DNA轉染，是研究感興趣的基因功能或蛋白質的常用方法。

二、基因組編輯

CRISPR/Cas9系統(tǒng)在哺乳動物細胞中的使用最近已經成為在特定基因座修飾細胞基因組的一種非常方便的方法。它涉及將（a）編碼Cas9的一個或多個質粒、特異性gRNA和最終要插入的序列，或（b）一個或兩個質粒和RNA分子（gRNA）的混合物瞬時轉染到哺乳動物細胞中。

三、siRNA轉染

jetPRIME?可使多種細胞系的內源性基因表達降低90%以上。例如，jetPRIME?介導的用靶向HeLa細胞中內源性層粘連蛋白A/C的10nM siRNA雙鏈體轉染HeLa細胞，將層粘連蛋白/C基因表達顯著降低到幾乎無法檢測的水平（圖1）。

圖1  使用jetPRIME?的內源性層粘連蛋白A/C沉默。用10nM的21-mer層粘連蛋白A/C siRNA轉染HeLa細胞。48小時后，使用抗層粘連蛋白A/C的抗體通過免疫熒光顯微鏡評估層粘連蛋白/C沉默。

四、不同核酸的共轉染

jetPRIME?非常適合DNA和siRNA/miRNA共轉染實驗或幾種DNA質粒的共遞送。

Polyplus用jetPRIME?進行了DNA和siRNA遞送，并在各種毒性極低的細胞系中觀察到高效的基因沉默。使用10nM的siRNA，在貼壁細胞中實現(xiàn)了超過90%的沉默（圖2）。

圖2 使用jetPRIME?進行DNA和siRNA共轉染后，幾種細胞系中的外源性螢光素酶沉默。在6孔板中用每孔400ng p4CMV Luc和10nM熒光素酶siRNA進行實驗。

產品優(yōu)勢：

 ★  高DNA轉染效率；

 ★  核酸含量低；

 ★  優(yōu)越的細胞活力；

 ★  一種用于DNA和/或siRNA轉染的試劑；

 ★  性價比高。

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