Polybrene (10mg/ml) 聚凝胺 (10mg/ml)

貨號：NBS2554-1ml；

NBS2554-5ml

品牌：NoninBio

基本介紹：

Hexadimethrine Bromide，中文名海（地）美溴銨，CAS：28728-55-4，一種多聚陽離子聚合物，廣為人知的一種抗肝素劑（肝素拮抗劑），歸于其中和紅細(xì)胞表面凈負(fù)電荷的能力，常用來產(chǎn)生紅細(xì)胞的非特異性凝集。利用凝聚特性，也提供了一種準(zhǔn)確、快速和簡單的方法用來體外測定肝素活性。自動化測序分析小劑量的海美溴銨可明顯改善多肽的降解現(xiàn)象，因其加入提高PVDF膜的親水性，減低測序過程中多肽的機械損失。海美溴銨能夠增強脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率，常常用在哺乳動物細(xì)胞的DNA轉(zhuǎn)染實驗。比如，可轉(zhuǎn)染低分子量質(zhì)粒DNA進入細(xì)胞系（如CHO），這種細(xì)胞用其他方法如磷酸鈣共沉淀轉(zhuǎn)染相對比較難。也常用于逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染。作用原理可能在于能夠中和細(xì)胞表面唾液酸與病毒顆粒之間的靜電排斥和增強受體不依賴的病毒吸收，來增強病毒的感染效率。

本品為無菌溶液，濃度為10mg/ml，使用時一般按1:1000-1:2000稀釋，依細(xì)胞種類不同稀釋比例不同，具體查閱相關(guān)文獻或根據(jù)實驗室經(jīng)驗來調(diào)整。

基本特性：

1）CAS：28728-55-4

2）同義名：Hexadimethrine Bromide; 1,5-Dimethyl-1,5-diazaundecamethylene polymethobromide;

3）純度：≥94% (titration)

4）濃度:10mg/ml in H₂O，無菌

5）化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

保存與運輸方法：

保存：-20℃凍存二年穩(wěn)定。

運輸：冰袋運輸。

常見篩選濃度：

Polybrene（聚凝胺）是海（地）美溴銨（Hexadimethrine Bromide）液體制品的商標(biāo)名，是一種非常有效的基因轉(zhuǎn)染增強劑。用于病毒介導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)染常用濃度為8μg/ml，具體濃度依細(xì)胞類型會有差異，可參閱文獻或梯度實驗摸索。

Polybrene用于轉(zhuǎn)染增強劑，已經(jīng)成為全球各大實驗室和各種基因轉(zhuǎn)染服務(wù)機構(gòu)最通用的方法之一，相比于硫酸魚精蛋白（Protamine sulfate，CAS：98001-69-5）和其他陽離子的使用普遍率更高更廣泛。發(fā)表的文獻至少上萬篇。

參考使用濃度【文獻來源】：

1）用表達H-rasV12或小鼠Trop2基因的慢病毒感染新鮮制備的小鼠皮膚角質(zhì)細(xì)胞（Keratinocytes），使用含4 μg/ml polybrene的培養(yǎng)基孵育48h。之后收集細(xì)胞。

文獻：Wang J, et al. Loss of Trop2 Promotes Carcinogenesis and Features of Epithelial to Mesenchymal Transition in Squamous Cell Carcinoma. Mol Cancer Res. 2011 Dec;9(12):1686-95.

2）用ATF3 shRNA慢病毒顆粒感染6孔板培養(yǎng)的HepG2細(xì)胞，加入含10 μg/ml polybrene的培養(yǎng)基孵育24h，polybrene用來增強慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。用嘌呤霉素（10μM）篩選陽性轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞株。

文獻：Weng S, et al. Niclosamide induced cell apoptosis via upregulation of ATF3 and activation of PERK in Hepatocellular carcinoma cells. BMC Gastroenterol. 2016 Feb 25;16:25.

3）用TLR10 shRNA慢病毒顆粒感染THP-1細(xì)胞，細(xì)胞先于polybrene（8 μg/ml）混合后，將病毒加入細(xì)胞，病毒感染復(fù)數(shù)（MOI）為10。24h之后更換不含polybrene的新鮮培養(yǎng)基。用嘌呤霉素（1 μg/ml）篩選陽性克隆株。

文獻：Le HV, et al.Stable Toll-Like Receptor 10 Knockdown in THP-1 Cells Reduces TLR-Ligand-Induced Proinflammatory Cytokine Expression. Int J Mol Sci. 2016 Jun 1;17(6).

4）為提高腺病毒轉(zhuǎn)染效率和LacZ轉(zhuǎn)基因表達，使用6μg/ml Polybrene處理病毒載體后轉(zhuǎn)入BHK-21細(xì)胞（MOI為100），轉(zhuǎn)染率提高到95%，沒有用Polybrene處理的只有2.3%轉(zhuǎn)染率。

5）NPC細(xì)胞（50% confluence）用含5 μg/ml Polybrene的NBF培養(yǎng)基，之后用 ZNF804A shRNA慢病毒顆粒感染細(xì)胞；24h后，更換不含polybrene的NBF培養(yǎng)基。24-48h之后，加入嘌呤霉素（5 μg/ml）篩選陽性克隆株。

文獻：Chen J, et al. ZNF804A Transcriptional Networks in Differentiating Neurons Derived from Induced Pluripotent Stem Cells of Human Origin. PLoS One. 2015 Apr 23;10(4):e0124597.