BCECF AM, Cell Permeant pH熒光探針

【務(wù)必注意】：初次使用離子探針的用戶，強烈建議配合：Pluronic F-127, Cell Culture Tested 細(xì)胞培養(yǎng)級（NBS2009-1g）一起使用，以提高探針的水溶性和胞內(nèi)加載性。 

產(chǎn)品簡介：

BCECF, AM是一種廣泛使用的檢測細(xì)胞質(zhì)pH值的熒光探針。具有細(xì)胞膜滲透性，進(jìn)入細(xì)胞后被胞內(nèi)酯酶水解生成BCECF，一種極性熒光衍生物從而被保留在細(xì)胞內(nèi)。BCECF在細(xì)胞內(nèi)很穩(wěn)定，排出半衰期超過2小時。胞內(nèi)pH測定通過比率成像實現(xiàn)，通過確定pH依賴性的發(fā)射光強度比率（Ex=535nm），分別用490nm激發(fā)光激發(fā)和440nm激發(fā)光激發(fā)，使用熒光分光光度法（spectrofluorometry）或流式細(xì)胞儀檢測皆可。

BCECF,AM雖然主要用于哺乳動物細(xì)胞，也有報道用于植物細(xì)胞、細(xì)菌和酵母等的細(xì)胞pH水平檢測。BCECF, AM還被廣泛用于各種功能實驗，如細(xì)胞活力和毒性、凋亡、粘附、趨化、藥物抗性等引起的細(xì)胞pH變化檢測。BCECF, AM還能用于包括鉀離子在內(nèi)的其他離子的胞內(nèi)變化檢測。

產(chǎn)品特性：

1） CAS NO：117464-70-7

2） 化學(xué)名：3',6'-bis(acetyloxy)-5(or 6)-[[(acetyloxy)methoxy]carbonyl]-3-oxo-spiro[isobenzofuran-1(3H),9'- [9H]xanthene]-2',7'-dipropanoic acid, 2',7'-bis[(acetyloxy)methyl] ester

3） 同義名：BCECF Acetoxymethyl ester; 2',7'-Bis-(2-Carboxyethyl)-5-(and-6)-Carboxyfluorescein, Acetoxymethyl Ester;

4） 分子式：C39H36O19

5） 分子量：808.69

6） 純度：≥95%

7） 外觀：類白色至白色或淺黃色至暗黃色固體

8） 溶解性：溶于乙腈，DMSO，DMF

保存條件: 

-20℃避光干燥保存，2年有效。

產(chǎn)品使用：

1、 儲存液制備

實驗前將低溫保存的BCECF, AM置于室溫回溫至少20min。用高質(zhì)量的無水DMSO溶解粉末，使其充分溶解，配制成1-10mM儲存液。按照單次用量分裝后置于≤-20℃避光干燥保存，六個月穩(wěn)定。

【注意】：用水溶性緩沖液或培養(yǎng)基稀釋儲存液到需要濃度的工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用，不可保存。正常的BCECF, AM溶液無色且無熒光（淺色和弱熒光可接受）。

2、 BCECF, AM的加載（哺乳動物細(xì)胞）

大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞不需透化，直接用稀釋的細(xì)胞膜滲透BCECF, AM探針孵育即可加載。一旦進(jìn)入細(xì)胞，非特異酯酶水解非熒光AM前體，產(chǎn)生熒光且pH靈敏的探針。陽離子探針BCECF的低泄露率和小的細(xì)胞內(nèi)體積使得探針在胞內(nèi)的終濃度明顯高于胞外孵育濃度?？傮w而言，與鈣離子探針比如Fura-2相比，以AM形式加載的BCECF更少出現(xiàn)胞內(nèi)區(qū)域化。大量的實驗數(shù)據(jù)表明BCECF在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)是自由流動和解離的。

注意事項：

1.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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