5-(and-6)-Carboxy SNARF-1, Acetoxymethyl Ester, Acetate pH熒光探針

產品簡介：

細胞內pH在許多細胞事件起著重要的調節(jié)作用，這些事件包括細胞生長、鈣調節(jié)、酶活力、受體介導的信號轉導、離子轉運、內吞、趨化性、細胞黏附和其他細胞進程。發(fā)射pH敏感的熒光探針普遍用來監(jiān)測胞內pH變化。使用pH熒光探針的成像技術允許研究人員以更高的空間分辨率調研這些事件，采樣密度可通過其他技術比如微電極來完成。

5-(and-6)-Carboxy SNARF-1, Acetoxymethyl Ester, Acetate，常簡稱為Carboxy SNARF-1 AM，是一種細胞膜滲透性的pH熒光探針，胞內去酯化后的pKa約為7.5，因此，適用于測定pH 7.0-8.0之間的pH變化。Carboxy SNARF-1在酸性和堿性條件下呈現(xiàn)出顯著的pH依賴發(fā)射光遷移，從黃-橙色遷移到深紅色熒光。這一pH依賴性允許其測定雙發(fā)射波長（通常為580nm和640nm）下的熒光強度比率，從而用來定量測定pH。

Carboxy SNARF-1特別適合帶可見光固定波長激發(fā)源的儀器，包括共聚焦掃描顯微鏡、流式細胞儀和熒光酶標儀。該染料用氬離子激光器（488nm和514nm）都能良好激發(fā)。聯(lián)合Fura-2、Fluo-3和Indo-1能同時測定胞內pH和鈣離子。

產品特性：

1）  CAS NO：126208-13-7

2）  化學名：Spiro[7H-benzo[c]xanthene-7,1'(3H)isobenzofuran]-ar'-carboxylic acid, 3-(acetyloxy)-10- (dimethylamino)-3'-oxo-, (acetyloxy)methyl ester

3）  同義名：Carboxy SNARF-1 AM；C-SNARF-1 AM; 5-(6)-Carboxy RhodFluor, acetoxymethyl ester, acetate;

4）  分子式：C₃₂H₂₅NO₉

5）  分子量：567.55

6）  Ex/Em：激發(fā)波長（4888~530nm），發(fā)射波長（580nm and 640nm）

7）  溶解性：溶于DMSO

保存條件: 

20℃避光干燥保存，至少1年有效。

產品使用： 應用示例（來自文獻資源）

Ramshesh VK, Lemasters JJ. Imaging of mitochondrial pH using SNARF-1. Methods Mol Biol. 2012;810:243-248. doi:10.1007/978-1-61779-382-0_16. PMID: 22057572

SNARF-1加載方法：為了加載SNARF-1，培養(yǎng)的心肌細胞用5μM SNARF-1, Acetoxymethyl Ester（SNARF-1 AM）于37℃孵育45min。孵育過程中，胞內酯酶水解探針釋放SNARF-1 free acid使其保留在細胞漿內。細胞用KRH清洗兩遍，之后置于KRH或其它生理培養(yǎng)液內于顯微鏡下觀察。與其它的AM加載探針不同，SNARF-1能很好的加載進入線粒體，雖然這類加載可能具細胞特異性。為了促進更好的線粒體吸收，細胞用SNARF-1 AM在更低的溫度（4-12℃）孵育更長的時間。

Fig Confocal SNARF-1 ratio images of intracellular pH. A 1-day cultured cardiac myocyte was loaded with SNARF-1-AM (5 μM) for 45 min in culture medium at 37°C, and intracellular pH was measured by ratio imaging of SNARF-1 fluorescence before (baseline) and after 30, 40, and 42 min of chemical hypoxia.

注意事項：

1.      熒光染料都存在淬滅問題，操作或保存過程中盡量避光，減緩熒光淬滅。

2.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。