Organoid Dissociation Solution 類器官傳代消化液
貨號:E238001
規(guī)格:100ml
500ml
品牌:bioGenous
產(chǎn)品介紹
bioGenousTM Organoid Dissociation Solution(類器官傳代消化液)可應(yīng)用于多種哺乳動物(如人、鼠、豬、蝙蝠、牛等)來源類器官的常規(guī)傳代,可使類器官從基質(zhì)膠中分離,并可使其溫和地消化為小細(xì)胞簇或單細(xì)胞,同時保持其傳代后的生長活力。
技術(shù)參數(shù)
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品組成 | 貨號 | 規(guī)格 | 儲存條件及周期 |
bioGenousTM Organoid Dissociation Solution | E238001 | 100mL/500mL |
類器官消化過程中可能應(yīng)用到的其他試劑
試劑 | 推薦貨號 |
Organoid Basal Medium | B213152 & B213151 |
Fetal Bovine Serum, FBS | - |
類器官的消化傳代
1. 向回收后的類器官中加入 5-10倍類器官基質(zhì)膠混合物體積的Organoid Dissociation Solution(類器官傳代消化液),吹打混勻后在37°C條件下孵育1-8分鐘使類器官解離(需提前取所需體積的消化液在37℃條件下預(yù)熱,通常單層結(jié)構(gòu)類器官的消化時間為0.5-3分鐘,多層或者體積較大的類器官消化時間為3-8分鐘)。
注意:在此操作過程中須仔細(xì)監(jiān)測消化過程,避免過度消化。在消化過程中,可使用移液器吹打混勻幫助消化。也可實(shí)時取少量消化懸液于顯微鏡下觀察消化情況,當(dāng)觀察到較多的單細(xì)胞或直徑在50μm以下的細(xì)胞簇后,即可認(rèn)為消化完成。
2. 在確認(rèn)消化完成的懸液中,加入至少五倍體積的類器官基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋,從而終止消化作用。
注意:時間較長的消化過程結(jié)束后可適當(dāng)加入胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)至終濃度2%-5%以保證消化后細(xì)胞的活力。
3. 將上步驟所獲類器官懸液進(jìn)行離心(水平離心轉(zhuǎn)子,150-300g,3分鐘),棄上清,再次加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基重懸類器官沉淀。
4. 將上步驟所獲類器官懸液進(jìn)行離心(水平離心轉(zhuǎn)子,150-300g,3分鐘),棄上清后所獲類器官可用于后續(xù)類器官培養(yǎng)、凍存等實(shí)驗(yàn)操作。