Organoid Cryopreservation Medium(Serum Free) 類器官凍存液
貨號:E238023
規(guī)格:100ml
品牌:bioGenous
產(chǎn)品介紹
bioGenousTM Organoid Cryopreservation Medium (類器官凍存液)可應(yīng)用于多種哺乳動物(如人、鼠、豬、蝙蝠、牛等)來源的類器官和細(xì)胞系的低溫長期保存,該凍存液不含血清,不含任何動物來源成分,含有 10% DMSO。
技術(shù)參數(shù)
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品組成 | 貨號 | 規(guī)格 | 儲存條件及周期 |
bioGenousTM Organoid Cryopreservation Medium(Serum Free) | E238023 | 100mL |
類器官(或細(xì)胞)的凍存和復(fù)蘇
需選用生長狀態(tài)良好的類器官(或細(xì)胞)進行凍存實驗。
類器官(或細(xì)胞)的凍存
1. 向離心后的類器官(或細(xì)胞)中加入預(yù)冷的(2-8℃)Organoid Cryopreservation Medium(類器官凍存液),吹打混勻后迅速轉(zhuǎn)移至細(xì)胞凍存管中(凍存管內(nèi)細(xì)胞懸液體積應(yīng)大于0.5mL)。
注意:每1mL凍存液推薦凍存1x103-1x107個細(xì)胞或?qū)?yīng)細(xì)胞量的類器官。
2. 將凍存管放入細(xì)胞凍存程序降溫盒內(nèi)(降溫盒須提前平衡至室溫或4℃),隨后立即將降溫盒放入-80 ℃超低溫冰箱中;也可將凍存管進行人工梯度降溫處理,如4℃ 靜置10分鐘,-20℃保存1小時,-80℃保存過夜。
3. 次日或12小時后將凍存管于低溫條件下(不高于-70℃,推薦使用干冰或原降溫盒)轉(zhuǎn)移至液氮中長期保存。
類器官(或細(xì)胞)的復(fù)蘇
4. 提前在37℃條件下預(yù)熱類器官(或細(xì)胞)所需的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
5. 在37℃的水浴中快速解凍細(xì)胞凍存管,當(dāng)凍存管內(nèi)凍存物僅剩些許冰渣殘留時立即停止水浴并及時轉(zhuǎn)移至潔凈操作臺。
6. 將凍存懸液轉(zhuǎn)移至離心管中,緩緩加入5-10倍體積的預(yù)熱的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,輕輕混勻。
7. 將上步驟所獲類器官(或細(xì)胞)懸液進行離心(水平離心轉(zhuǎn)子,150-300g,3分鐘),棄上清,再次加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基重懸類器官(或細(xì)胞)沉淀。
8. 將上步驟所獲類器官(或細(xì)胞)懸液進行離心(水平離心轉(zhuǎn)子,150-300g,3分鐘),棄上清后所獲類器官(或細(xì)胞)可用于后續(xù)類器官(或細(xì)胞)的培養(yǎng)。