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Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml)

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Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml)

Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml)
NA0531-1ML
NA0531-5ML
NA0531-10ML
品牌:NoninBio
促銷: 450.00~3600.00
價(jià)格: 565.00~4500.00
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Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml)

目錄號

NA0531-1ML



規(guī)格

1ml

運(yùn)輸溫度

冰袋運(yùn)輸

其他名稱

Blasticidin   S Hydrochloride 滅瘟素S鹽酸鹽;稻瘟散;

保存溫度

-20℃保存

CAS號

3513-03-9

有效期

2年

應(yīng)用

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選抗生素

產(chǎn)品簡介:

Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S(滅瘟素)(10   mg/ml)

 

產(chǎn)品標(biāo)簽

Blasticidin 殺稻瘟菌素;10mg/ml;bls 乙酰轉(zhuǎn)移酶基因;bsr或BSD   脫氨酶基因;遺傳霉素G418;Hygromycin     B 潮霉素B;CAS:3513-03-9

 

產(chǎn)品描述

Blasticidin S(殺稻瘟菌素),也稱為滅瘟素S鹽酸鹽,稻瘟散,從灰色鏈霉菌Streptomyces   griseochromogenes分離到的一種核苷肽類抗生素。主要通過干擾核糖體中肽鍵的形成來特異性抑制原核和真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成。殺稻瘟菌素S用于篩選攜帶bsr或BSD基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞。殺稻瘟菌素S具有快速而強(qiáng)效的作用模式,一個(gè)星期內(nèi)完成陽性克隆的篩選,且很低的抗生素濃度便能導(dǎo)致細(xì)胞迅速死亡。

 

本品為溶于HEPES buffer,pH 7.5的無菌溶液,濃度為10mg/ml。用于細(xì)菌篩選的常用濃度為25-100μg/ml,用于哺乳動物細(xì)胞篩選的常用濃度為1-50μg/ml,初次實(shí)驗(yàn)建議通過滅殺曲線來確定最佳使用濃度。

 

產(chǎn)品特性

1)同義名:Blasticidin   S   Hydrochloride滅瘟素S鹽酸鹽;稻瘟散;

2)CAS NO.:3513-03-9

3)分子式:C17H26N8O5·HCl

4)分子量:458.9

5)純度:>95%(HPLC)

6)化學(xué)結(jié)構(gòu)式:

     

 

保存與運(yùn)輸方法

保存:-20℃保存,2年有效,避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸:冰袋運(yùn)輸。

 

使用濃度

1)大腸桿菌(E. coli)(常用濃度:25-100μg/ml)

E. Coli對Blasticidin   S敏感性很弱,但含Blasticidin S抗性的轉(zhuǎn)化子可在低鹽LB固體培養(yǎng)基(pH 8.0),100μg/ml Blasticidin   S的條件下進(jìn)行篩選。高pH可增強(qiáng)抗生素篩選活性。

 

2)哺乳動物細(xì)胞(常用濃度:1-50μg/ml)

哺乳動物細(xì)胞系BlasticidinS的常用工作濃度范圍1-50 μg/ml。初次實(shí)驗(yàn)建議通過滅殺曲線來確定最佳使用濃度。

一些哺乳動物細(xì)胞的建議工作濃度:

細(xì)胞系                          

培養(yǎng)基                             

Blasticidin篩選濃度          

CHO

DMEM

5-10μg/ml

HEK293

DMEM

5-15μg/ml

HeLa

DMEM

2.5-10μg/ml

Neuro2a

DMEM

30μg/ml

B16

RMPI

3-10μg/ml

PC1.0

RMPI

10-30μg/ml

THP-1

RMPI

10μg/ml

 

操作步驟

Blasticidin S常用濃度范圍1-50 μg/ml,以10 μg/ml為多,初次實(shí)驗(yàn)建議通過滅殺曲線來確定最佳使用濃度。攜帶bsr或BSD基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞后,用含有Blasticidin S的正常生長培養(yǎng)基來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)克隆。

1)轉(zhuǎn)染48h后,用含適宜濃度Blasticidin   S的新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞傳代;【注】:細(xì)胞處于活躍分裂期時(shí)抗生素工作最好。細(xì)胞密度太高,抗生素效率降低。分盤時(shí)覆蓋率最好不超過25%。

2)每3-4天去除舊培養(yǎng)基,加入含相同濃度Blasticidin S的新鮮培養(yǎng)基;

3)7天后評估細(xì)胞集落形成。根據(jù)宿主細(xì)胞種類和轉(zhuǎn)染/篩選效率,集落形成可能需要再增加一周或更久。

4)轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆到35mm細(xì)胞培養(yǎng)盤,加入選擇培養(yǎng)基維持培養(yǎng)7天。隨后進(jìn)行細(xì)胞毒性檢測。

 

注意事項(xiàng)

1)Blasticidin S為有毒化合物,操作時(shí)需注意防護(hù),切勿與身體或皮膚直接接觸。

2)為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。