Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas

脫氧核糖核酸酶I，來(lái)源于牛胰腺

DNase l 脫氧核糖核酸酶 I 

貨號(hào)：NBS0401-15ku，NBS0401-50ku

品牌：NoninBio

產(chǎn)品描述

脫氧核糖核酸酶I，英文Deoxyribonuclease I，縮寫(xiě)DNase I，在大多數(shù)細(xì)胞和組織中都能發(fā)現(xiàn)的一種核酸內(nèi)切酶，偏好切割鄰近嘧啶的磷酸二酯鍵，產(chǎn)生5’端為磷酸基團(tuán)、3’端為羥基的多聚核苷酸，平均消化產(chǎn)物最小為多聚四核苷酸。Mg2+存在條件下，DNase I可隨機(jī)識(shí)別和切斷DNA任一條鏈上的任意位點(diǎn)；而在Mn2+存在條件下，DNase I識(shí)別DNA的兩條鏈并在幾乎相同的位點(diǎn)進(jìn)行切割。DNase I可水解多種形式DNA，如單鏈DNA、雙鏈DNA，甚至染色質(zhì)（其切割速率受組蛋白影響）。

脫氧核糖核酸酶I，英文Deoxyribonuclease I，縮寫(xiě)DNase I，最早從胰腺中分離而來(lái)，至今哺乳動(dòng)物胰腺也是最主要的來(lái)源之一。DNase I以?xún)蓪?duì)二硫鍵結(jié)合的多種糖蛋白混合形式存在。最佳的工作范圍是pH 7-8，DNase的活性依賴(lài)于Ca2+，并可被二價(jià)金屬離子如Co2+，Mn2+，Zn2+等激活。5mM Ca2+可保護(hù)酶使其不被水解，而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原來(lái)的1/2。

本品來(lái)自牛胰腺，色譜純化制備，常用于去除蛋白或RNA樣品中的DNA，或者用于向DNA中引入缺口使標(biāo)記堿基插入DNA。本品以含氯化鈣的凍干粉形式供應(yīng)，比活≥2000Kunit Units/mg蛋白。

產(chǎn)品特性

1．CAS NO：9003-98-9

2．蛋白純度：≥80%（biuret），色譜純化

3．比活力：≥2000Kunit Units/mg protein

4．活力定義：25℃，pH5.0條件下DNase催化底物DNA，使每毫升每分鐘ΔA260增加0.001的變化定義為一個(gè)酶活力單位（Kunitz unit）。

5．激活劑：多種二價(jià)金屬離子如Mg2+、Mn2+、Ca2+、Co2+、and Zn2+

6．抑制劑：β-巰基乙醇；螯合劑；SDS；肌動(dòng)蛋白；并沒(méi)有特異性抑制DNase I酶活的通用抑制劑，比如檸檬酸鹽抑制Mg2+活化的DNase I，但不能影響Mn2+激活的DNase I。

7．溶解性：溶于0.15M NaCl（5mg/ml），無(wú)色透明溶液

保存與運(yùn)輸方法

保存：凍干粉-20℃干燥凍存，至少3年穩(wěn)定。

運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。

常見(jiàn)問(wèn)題

1． 如何溶解DNase I粉末？

將本品溶解于0.15 M NaCl溶液，可配置成5-10 mg/ml的儲(chǔ)存液，-20℃分裝凍存。需要注意：本品儲(chǔ)存液即使-20℃分裝凍存，一周可能會(huì)有＜10%活力損失；置于2-8℃，約會(huì)有20%活力損失。

2．如何將本品活力換算成質(zhì)量？

根據(jù)本品各批次的比活力和蛋白含量，比如當(dāng)酶比活力為2000 Kunits/mg，蛋白含量為100%（biuret）也，那么15KU=15000Kunits/2000Kunits/mg/100%=7.5mg本品。

3．使用多大濃度DNase I用來(lái)去除溶液內(nèi)的DNA？

在含50mM Tris-HCl（pH7.5），10mM MgCl2的溶液體系內(nèi)，加入20-50μg DNase I，并于37℃孵育60min以去除DNA污染。本用量?jī)H作參考，具體實(shí)驗(yàn)請(qǐng)做適當(dāng)調(diào)整。