Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas

脫氧核糖核酸酶I，來源于牛胰腺

DNase l 脫氧核糖核酸酶 I 

貨號：NBS0401-15ku，NBS0401-50ku

品牌：NoninBio

產(chǎn)品描述

脫氧核糖核酸酶I，英文Deoxyribonuclease I，縮寫DNase I，在大多數(shù)細胞和組織中都能發(fā)現(xiàn)的一種核酸內(nèi)切酶，偏好切割鄰近嘧啶的磷酸二酯鍵，產(chǎn)生5’端為磷酸基團、3’端為羥基的多聚核苷酸，平均消化產(chǎn)物最小為多聚四核苷酸。Mg2+存在條件下，DNase I可隨機識別和切斷DNA任一條鏈上的任意位點；而在Mn2+存在條件下，DNase I識別DNA的兩條鏈并在幾乎相同的位點進行切割。DNase I可水解多種形式DNA，如單鏈DNA、雙鏈DNA，甚至染色質(zhì)（其切割速率受組蛋白影響）。

脫氧核糖核酸酶I，英文Deoxyribonuclease I，縮寫DNase I，最早從胰腺中分離而來，至今哺乳動物胰腺也是最主要的來源之一。DNase I以兩對二硫鍵結(jié)合的多種糖蛋白混合形式存在。最佳的工作范圍是pH 7-8，DNase的活性依賴于Ca2+，并可被二價金屬離子如Co2+，Mn2+，Zn2+等激活。5mM Ca2+可保護酶使其不被水解，而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原來的1/2。

本品來自牛胰腺，色譜純化制備，常用于去除蛋白或RNA樣品中的DNA，或者用于向DNA中引入缺口使標記堿基插入DNA。本品以含氯化鈣的凍干粉形式供應(yīng)，比活≥2000Kunit Units/mg蛋白。

產(chǎn)品特性

1．CAS NO：9003-98-9

2．蛋白純度：≥80%（biuret），色譜純化

3．比活力：≥2000Kunit Units/mg protein

4．活力定義：25℃，pH5.0條件下DNase催化底物DNA，使每毫升每分鐘ΔA260增加0.001的變化定義為一個酶活力單位（Kunitz unit）。

5．激活劑：多種二價金屬離子如Mg2+、Mn2+、Ca2+、Co2+、and Zn2+

6．抑制劑：β-巰基乙醇；螯合劑；SDS；肌動蛋白；并沒有特異性抑制DNase I酶活的通用抑制劑，比如檸檬酸鹽抑制Mg2+活化的DNase I，但不能影響Mn2+激活的DNase I。

7．溶解性：溶于0.15M NaCl（5mg/ml），無色透明溶液

保存與運輸方法

保存：凍干粉-20℃干燥凍存，至少3年穩(wěn)定。

運輸：冰袋運輸。

常見問題

1． 如何溶解DNase I粉末？

將本品溶解于0.15 M NaCl溶液，可配置成5-10 mg/ml的儲存液，-20℃分裝凍存。需要注意：本品儲存液即使-20℃分裝凍存，一周可能會有＜10%活力損失；置于2-8℃，約會有20%活力損失。

2．如何將本品活力換算成質(zhì)量？

根據(jù)本品各批次的比活力和蛋白含量，比如當酶比活力為2000 Kunits/mg，蛋白含量為100%（biuret）也，那么15KU=15000Kunits/2000Kunits/mg/100%=7.5mg本品。

3．使用多大濃度DNase I用來去除溶液內(nèi)的DNA？

在含50mM Tris-HCl（pH7.5），10mM MgCl2的溶液體系內(nèi)，加入20-50μg DNase I，并于37℃孵育60min以去除DNA污染。本用量僅作參考，具體實驗請做適當調(diào)整。