PM2030 Minimal SD Base

英文名：Minimal SD Base

儲(chǔ)存條件：RT

SD（synthetically defined）系列培養(yǎng)基屬于Minimal medium，也可以稱為不完全培養(yǎng)基。Minimal SD Base由硫酸銨、微量元素、葡萄糖按比例混合而成，可以提供野生型酵母菌維持生存所需的基本物質(zhì)，但不包含突變菌株必需的氨基酸。Minimal SD Agar Base在前者基礎(chǔ)上加入Agar。Minimal SD Base Gal/Raf由硫酸銨、微量元素、半乳糖及棉子糖混合而成；Minimal SD Base Gal由硫酸銨、微量元素、半乳糖混合而成；Minimal SD Base Raf 由硫酸銨、微量元素、棉子糖混合而成，對(duì)應(yīng)的固體培養(yǎng)基均在其基礎(chǔ)上加入Agar。

缺陷氨基酸混合物添加到Minimal SD Base中可以配制成篩選培養(yǎng)基，用于選擇培養(yǎng)含有特異載體的酵母或進(jìn)行雜交篩選。例如，Minimal SD Base添加DO Supplement-Leu或DO Supplement-Trp分別用于篩選bait和prey載體（bait和prey載體帶有合成色氨酸和亮氨酸的基因）。攜帶這兩個(gè)載體的酵母細(xì)胞可以在雙缺篩選培養(yǎng)基SD/-Leu/-Trp（Minimal SD Base添加DO Supplement-Leu/-Trp）生長(zhǎng)，而不含有這兩個(gè)基因的親代酵母菌株（如Y2H Gold）不能生長(zhǎng)。    

使用方法：

Minimal Liquid Media with Glucose (Broth)

1. 在1 L去離子水中加入相應(yīng)量的Minimal SD Base和Dropout Supplements（缺陷型氨基酸混合物），攪拌溶解。

2. 調(diào)節(jié)pH 至5.8。121℃高壓滅菌15分鐘。

3. 4℃冰箱避光儲(chǔ)存已經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基。

Minimal Plating Media with Glucose and Agar

1. 在500 ml去離子水中加入相應(yīng)量Minimal SD Agar Base和Dropout Supplements（缺陷型氨基酸混合物），攪拌溶解（瓊脂在高溫滅菌后溶解）。

2. 調(diào)節(jié)pH 至5.8。121℃高壓滅菌15分鐘。

3. 冷卻到50℃把培養(yǎng)基倒入平板中，室溫使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。

為什么我做的平板不凝？

    自行添加Agar，務(wù)必選用優(yōu)質(zhì)Agar（CA1331），添加量為20 g/L。固體培養(yǎng)基不凝固可能是由于pH值偏低或者滅菌時(shí)間過(guò)長(zhǎng)（也會(huì)降低pH值）；水質(zhì)偏酸也會(huì)使得培養(yǎng)基偏酸，建議滅菌前調(diào)整SD系列培養(yǎng)基的pH至5.8。121℃，高壓滅菌15min，及時(shí)從滅菌鍋內(nèi)取出培養(yǎng)基。