Dual-Luciferase? Reporter (DLRTM) Assay System (Dual_x005f[1]Luciferase? 雙螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng) ) 為雙報告基因檢測提供 有效的手段。 在 DLRTM 檢測中，螢火蟲 (Photinus pyralis) 螢光素酶 和海腎 (Renilla reniformis) 螢光素酶的活性可在單個樣品中依次檢 測。

首先檢測螢火蟲螢光素酶，將螢光素酶檢測試劑 II(Luciferase Assay Reagent II, LAR II)加入樣品中，產(chǎn)生的光信號至少持續(xù)1分鐘。 定量螢火蟲螢光強度后，再在同一個樣品中加入 Stop & Glo? 試劑， 將上述反應(yīng)終止，同時啟動海腎螢光素酶反應(yīng)。使用帶有試劑自動注 射器的發(fā)光檢測儀，可在 4 秒內(nèi)完成兩個檢測。在 DLRTM 檢測系統(tǒng)中， 兩個報告基因產(chǎn)生的線性檢測的靈敏度均可達埃摩爾級 (<10-18)，在 實驗宿主細胞內(nèi)均無內(nèi)源活性。而且，DLRTM 檢測的一體化模式既可 快速定量檢測轉(zhuǎn)染細胞，也可用于快速定量檢測無細胞轉(zhuǎn)錄 / 翻譯反 應(yīng)體系中的兩個報告基因。 Promega 推薦使用針對 DLRTM 檢測系統(tǒng)進行過確證的發(fā)光檢測 儀，這些發(fā)光檢測儀均帶有 DLReadyTM 標識。 pGL4 螢光素酶報告基因載體是針對 DLRTM 檢測系統(tǒng)而設(shè)計。組 成型表達的海腎螢光素酶載體可與任何實驗用螢火蟲螢光素酶載體聯(lián) 合共轉(zhuǎn)染哺乳動物細胞。

Cat.# E1960 和 E1980 產(chǎn)品請注意：系統(tǒng)中已提供了足夠的 Passive Lysis Buffer，能夠進行 96 孔板細胞的 1,000 次檢測 ( 一 般每孔用 20μl 1X PLB)。若需要更多的 Passive Lysis Buffer( 如 >100μl/ 孔 )，可單獨購買。

特點

? 準確性更高：使用海腎螢光素酶做內(nèi)對照可得到更精確的結(jié)果。

? 方便：無需分開樣品，可節(jié)省平板和時間。

? 靈敏：可用于研究弱啟動子，低水平表達 / 調(diào)控和轉(zhuǎn)染不佳的細 胞的表達。

? 線性范圍：線性范圍超過 7 個數(shù)量級；活性很高的樣品一般無需 稀釋。