ACE(南京艾思易)Magneti-G Flag標(biāo)簽免疫沉淀/免疫共沉淀試劑盒
貨號:BK0048-01;BK0048-02
規(guī)格:10T;50T
品牌:ACE
1.1Magneti-G 商標(biāo)
Magneti-G 商標(biāo)來自于磁性(Magnetic)的英文諧音,G 為高聚物的漢語拼音的首字母,因此帶有這一商標(biāo)的產(chǎn)品,均為高聚物材質(zhì)的磁性微球。這 一 商 標(biāo) 主 要 用 于 一 系 列 基 于 抗 體 親 和 方 法 的 標(biāo) 簽 蛋 白 IP 試 劑 盒,目 前 已 有 Anti-His-tag、Anti-Myc-tag、Anti-HA-tag、Anti-DYKDDDDK-tag、Anti-GFP-tag 和 Anti-RFP-tag 六種標(biāo)簽 IP 試劑盒。后續(xù)將根據(jù)客戶的需求,基于 Magneti-G 高聚物磁珠開發(fā)更多相關(guān)產(chǎn)品。
1.2 DYKDDDDK 標(biāo)簽
DYKDDDDK肽段是融合蛋白表達(dá)純化過程中最常用的標(biāo)簽(tag)之一。它可以連接在融合蛋白的 N 端、C 端或序列中間,具有極好的親水性,更容易展示在融合蛋白的表面,干擾融合蛋白功能的可能性較小。這一標(biāo)簽還具有一個優(yōu)勢:連接在目的蛋白的N 端時,可以被Enterokinase (EK protease)從序列 C 端賴氨酸的位置切除,而不留下冗余殘基。
1.3 Anti-DYKDDDDK 抗體
DYKDDDDK 肽段也經(jīng)常被稱為 Flag 肽段 , 是 Sigma 公司的注冊商標(biāo)。大約四十年前,該公司最早篩選了一系列抗 DYKDDDDK 標(biāo)簽的抗體,分別命名為 Anti-Flag M1,Anti-Flag M2, Anti-Flag M5 等,其中 M2 抗體廣泛用于免疫雜交、免疫沉淀、親和純化等方向。本公司目前有兩株Anti-DYKDDDDK 抗體,親和力都要高于 Anti-Flag M2 抗體,更適合做 WB、IP 等蛋白互作實驗。抗體帶有 biotin 修飾的人源化恒定區(qū)(hFc),可以被 SA-HRP、SA-RPE 識別,利于更高效的使用化學(xué)發(fā)光或者熒光方法進(jìn)行檢測。
1.4 試劑盒組分
抗體與對應(yīng)的標(biāo)簽之間有特異性的結(jié)合,將抗體偶聯(lián)在 Beads 上,就可以把帶有對應(yīng)標(biāo)簽的融合蛋白結(jié)合到 Beads 上。經(jīng)過緩沖液去除雜蛋白等步驟之后,融合蛋白可以使用變性劑或者高溫處理等方式從 Beads 上洗脫下來。為方便使用,本試劑盒提供多種試劑方便客戶更好的進(jìn)行蛋白互作實驗,具體的組份見表 1。
試劑盒成份 | 名稱 | 特征 |
蛋白磁珠 | Magneti-G Anti-DYKDDDDK Beads | 偶聯(lián)了標(biāo)簽抗體的磁性高聚物微球 |
裂解緩沖液 | IP Lysis Buffer A(5×) | 細(xì)胞清洗之后重懸細(xì)胞,也可以用來稀釋高濃度的去污劑 |
IP Lysis Buffer B | 含有高濃度的去污劑,能夠打開細(xì)胞膜釋放蛋白 | |
洗脫液 | Elution Buffer D | 含有變性劑和離液劑,蛋白失活 |
蛋白上樣緩沖液 | SDS Loading Buffer(2×) | 重懸磁珠后高溫處理5-10min,能夠?qū)⒛康牡鞍字笙聛?/td> |
陽性對照 | 紅色熒光蛋白(DYKDDDDK標(biāo)簽) | 帶有DYKDDDDK標(biāo)簽的紅色熒光蛋白 |
名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
Magneti-G DYKDDDDK標(biāo)簽免疫沉淀/共沉淀試劑盒 | BK0048-01 | 10T |
BK0048-02 | 50T |