產(chǎn)品信息:
產(chǎn)品名稱:外泌體熒光染料(DiR)
產(chǎn)品貨號:NW3201
產(chǎn)品規(guī)格:200 μL(1 mM)
產(chǎn)品保存:-20℃避光(1 年有效)
DiR是一種親脂性的近紅外熒光花青染料。其兩個(gè)18-碳鏈可以與細(xì)胞膜或親脂性生物分子結(jié)合,從而進(jìn)行特定、穩(wěn)定的染色。DiR所發(fā)射的紅外光可以高效地穿過細(xì)胞和組織,所以常用于活體成像和示蹤。
產(chǎn)品參數(shù)
分子式:C63H101IN2
分子量:1013.4
溶劑:DMSO
λEx/λEm(MeOH) = 748/780 nm
常見問題:
1、 活體成像對外泌體濃度要求較高,建議用于染料標(biāo)記的外泌體原始濃度達(dá)到0.5~1.5 μg/μL,外泌體濃度過低實(shí)驗(yàn)失敗風(fēng)險(xiǎn)較高。
2、 外泌體染色步驟中去除游離染料的第3、4步必不可少,以避免游離染料對后期實(shí)驗(yàn)的干擾。這一步相當(dāng)于重新提取外泌體,所有外泌體提取純化方式都適用。
3、 DiR碘化物(DiR染料)的發(fā)射波長肉眼不可見,需要使用配備CCD鏡頭或其他設(shè)備的近紅外檢測儀器,建議使用活體成像儀。
4、 建議染料標(biāo)記的外泌體在注射后24 h內(nèi)設(shè)置梯度時(shí)間進(jìn)行觀測,多數(shù)情況下,在注射后2~8 h熒光強(qiáng)度達(dá)到峰值。為保證觀察結(jié)果,小動(dòng)物需要做剃毛處理。
5、 由于以下兩個(gè)原因,建議制備2倍于活體成像或示蹤實(shí)驗(yàn)所需外泌體量以進(jìn)行染料標(biāo)記:1)外泌體染色效率難以達(dá)到100%;2)在去游離染料過程中無法避免外泌體的損失。