Dual-Luciferase? Reporter (DLRTM) Assay System (Dual_x005f[1]Luciferase? 雙螢光素酶報(bào)告基因檢測系統(tǒng) ) 為雙報(bào)告基因檢測提供 有效的手段。 在 DLRTM 檢測中，螢火蟲 (Photinus pyralis) 螢光素酶 和海腎 (Renilla reniformis) 螢光素酶的活性可在單個(gè)樣品中依次檢 測。

首先檢測螢火蟲螢光素酶，將螢光素酶檢測試劑 II(Luciferase Assay Reagent II, LAR II)加入樣品中，產(chǎn)生的光信號至少持續(xù)1分鐘。 定量螢火蟲螢光強(qiáng)度后，再在同一個(gè)樣品中加入 Stop & Glo? 試劑， 將上述反應(yīng)終止，同時(shí)啟動海腎螢光素酶反應(yīng)。使用帶有試劑自動注 射器的發(fā)光檢測儀，可在 4 秒內(nèi)完成兩個(gè)檢測。在 DLRTM 檢測系統(tǒng)中， 兩個(gè)報(bào)告基因產(chǎn)生的線性檢測的靈敏度均可達(dá)埃摩爾級 (<10-18)，在 實(shí)驗(yàn)宿主細(xì)胞內(nèi)均無內(nèi)源活性。而且，DLRTM 檢測的一體化模式既可 快速定量檢測轉(zhuǎn)染細(xì)胞，也可用于快速定量檢測無細(xì)胞轉(zhuǎn)錄 / 翻譯反 應(yīng)體系中的兩個(gè)報(bào)告基因。 Promega 推薦使用針對 DLRTM 檢測系統(tǒng)進(jìn)行過確證的發(fā)光檢測 儀，這些發(fā)光檢測儀均帶有 DLReadyTM 標(biāo)識。 pGL4 螢光素酶報(bào)告基因載體是針對 DLRTM 檢測系統(tǒng)而設(shè)計(jì)。組 成型表達(dá)的海腎螢光素酶載體可與任何實(shí)驗(yàn)用螢火蟲螢光素酶載體聯(lián) 合共轉(zhuǎn)染哺乳動物細(xì)胞。

Cat.# E1960 和 E1980 產(chǎn)品請注意：系統(tǒng)中已提供了足夠的 Passive Lysis Buffer，能夠進(jìn)行 96 孔板細(xì)胞的 1,000 次檢測 ( 一 般每孔用 20μl 1X PLB)。若需要更多的 Passive Lysis Buffer( 如 >100μl/ 孔 )，可單獨(dú)購買。

特點(diǎn)

? 準(zhǔn)確性更高：使用海腎螢光素酶做內(nèi)對照可得到更精確的結(jié)果。

? 方便：無需分開樣品，可節(jié)省平板和時(shí)間。

? 靈敏：可用于研究弱啟動子，低水平表達(dá) / 調(diào)控和轉(zhuǎn)染不佳的細(xì) 胞的表達(dá)。

? 線性范圍：線性范圍超過 7 個(gè)數(shù)量級；活性很高的樣品一般無需 稀釋。