Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas
核糖核酸酶A,來源于牛胰腺
Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas 核糖核酸酶A,來源于牛胰腺
NBS0302-100mg
NBS0302-500mg
NBS0302-1g
品牌:NoninBio
關(guān)鍵詞
Ribonuclease 3’-pyrimidinooligonucleotidohydrolase 核糖核酸3′-嘧啶寡核苷酸水解酶;Ribonuclease I 核糖核酸酶I;Pancreatic ribonuclease 胰核糖核酸酶;Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas;EC No: 3.1.27.5;CAS NO:9001-99-4;
產(chǎn)品描述
核糖核酸酶A,英文名Ribonuclease A,縮寫RNase A,CAS NO:9001-99-4,一種核糖核酸內(nèi)切酶(endoribonuclease),特異性識別嘧啶類核苷酸3’-核糖磷酸基團,如序列pG-pG-pC-pA-pG經(jīng)切割產(chǎn)生pG-pG-pCp和A-PG,當切割單鏈RNA時活性最高,推薦工作濃度為1-100μg/ml,兼容于各種反應(yīng)體系。低鹽濃度(0-100mM NaCl),可切割單鏈RNA,雙鏈RNA,以及RNA-DNA雜交形成的RNA鏈。高鹽濃度(≥0.3M),RNase A僅特異性切割單鏈RNA。RNase A不會水解DNA,因DNA缺少形成環(huán)形中間體必需的2’-OH。
核糖核酸酶A,英文名Ribonuclease A,縮寫RNase A,常常用在質(zhì)粒DNA或基因組DNA制備過程中去除RNA,此制備過程中DNase酶活性的存在與否是需要重視的污染之一,可采用水浴煮沸這種傳統(tǒng)方法來滅活DNase活性。也可以用來去除蛋白樣品中的RNA污染。另外,RNase A還可用于RNA序列分析,RNA酶保護分析等實驗。
產(chǎn)品特性
1)CAS NO:9001-99-4
2)來源:牛胰腺
3)比活力:≥50 Kunitz units/mg
4)最佳工作pH:7.6(pH 6.0-10.0有活性)
5)最佳工作溫度:60℃(15-70℃有活性)
6)激活劑:鈉鹽、鉀鹽等
7)抑制劑:核酸酶抑制劑(RNase inhibitor)
8)穩(wěn)定性:RNase在加熱和去污劑條件下都很穩(wěn)定。RNase A溶液可耐受溫度高達100℃。于此高溫下,pH 2.0-4.5范圍內(nèi)溶液穩(wěn)定性最高。
9)溶解性:溶于水(10mg/ml)
保存與運輸方法
保存:-20℃干燥凍存,3年穩(wěn)定。
運輸:冰袋運輸。
使用方法
1. 儲存液制備
【注意】:此為RNase A儲存液配制的常用方法之一,也可以根據(jù)實驗室傳統(tǒng)的方法,或者參考文獻資料使用其他方法制備儲存液(如直接溶于10mM Tris-HCl, pH 7.4)。
a)取適量RNase A溶解于10mM醋酸鈉(pH 5.2),配制成10mg/ml RNase A儲存液;
b)100℃加熱15min,之后冷卻到室溫,然后加入1/10體積的1M Tris-HCl(pH 7.4),調(diào)其pH至7.4(例如,5ml 10mg/ml的RNase儲存液加入500μl 1M Tris-HCl, pH7.4);
c)分裝成單次用量于-20℃凍存,可穩(wěn)定保存1年。
【注意】:在中性條件下煮沸RNase A溶液,會有RNase沉淀形成;在更低的pH下將其煮沸,如有沉淀可以觀察到,可能由于蛋白雜質(zhì)存在造成。煮沸之后若發(fā)現(xiàn)沉淀,可通過高速離心(13,000 rpm)去除雜質(zhì),然后分裝凍存。
2. 使用濃度
【注意】:本品應(yīng)用非常廣泛,具體的使用方法和工作濃度請根據(jù)實驗經(jīng)驗或參考文獻來調(diào)整。
RNase A常用在質(zhì)粒DNA制備中去除RNA污染,在此應(yīng)用中,可直接加入DNase-free RNase A儲存液,使其終濃度為10μg/ml。