該試劑盒把硅膠柱純化技術(shù)同經(jīng)典的SDS堿裂解法結(jié)合起來,用戶可在1小時內(nèi)從酵母培養(yǎng)液中純化出高純度的質(zhì)粒DNA。純化過程不需用任何到有害的有機(jī)物抽提,亦不需用到耗時的乙醇沉淀。質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量依賴于酵母攜帶質(zhì)粒的拷貝數(shù),酵母菌株以及生長條件。
一般來說,酵母質(zhì)粒的拷貝數(shù)較低,5.0ml過夜培養(yǎng)液中質(zhì)粒DNA產(chǎn)量約為1.0 μg左右。純化的質(zhì)??芍苯佑糜诿盖校琍CR,電轉(zhuǎn)化等應(yīng)用。酵母收集后,加入破壁酶和玻璃珠去除細(xì)胞壁,用傳統(tǒng)堿裂法裂解細(xì)胞,然后將獲得的上清液轉(zhuǎn)移至結(jié)合柱結(jié)合DNA,經(jīng)過兩次快速洗滌,最后用無菌水洗脫出質(zhì)粒DNA。