產(chǎn)品名稱:Trypsin EDTA Solution B (0.25%), EDTA (0.05%) 胰酶
貨號(hào):C3532-0100、C3532-0500
規(guī)格:100ml, 500ml
價(jià)格:詢價(jià)
【產(chǎn)品介紹】
胰蛋白酶是一種動(dòng)物源性產(chǎn)品,是培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中最常用的酶,胰蛋白酶是一種胰絲氨酸肽鏈內(nèi)切酶,作用于多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)。胰蛋白酶溶液作為細(xì)胞分離試劑廣泛應(yīng)用于貼壁細(xì)胞的連續(xù)培養(yǎng)。胰蛋白酶水解或胰蛋白酶化是蛋白質(zhì)被胰蛋白酶消化或處理的過(guò)程,因此被稱為胰蛋白酶化。
大多數(shù)細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)生長(zhǎng)為附著在基質(zhì)上的單層細(xì)胞層。當(dāng)進(jìn)行貼壁細(xì)胞傳代時(shí),這些細(xì)胞間及細(xì)胞與基質(zhì)之間的連接必須分離。蛋白水解酶,如胰蛋白酶(即絲氨酸肽酶),通過(guò)打破特定氨基酸之間的肽鍵,分離細(xì)胞與細(xì)胞基質(zhì),實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的傳代培養(yǎng)。EDTA是一種二價(jià)金屬離子螯合劑,用于結(jié)合抑制胰蛋白酶活性的鈣離子和鎂離子。
【適用范圍】
適用于貼壁細(xì)胞的消化傳代;也可用于組織細(xì)胞分離的初步消化。本產(chǎn)品消化能力強(qiáng),常用于比較難消化的細(xì)胞,如乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231等。
【使用方法】
1. 以T25培養(yǎng)瓶為例,細(xì)胞傳代時(shí),先將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基吸棄,加入3ml PBS或DPBS沖洗細(xì)胞,吸棄。
2. 加入1ml 胰酶消化液,浸潤(rùn)整個(gè)底面,放入37℃培養(yǎng)箱中消化3-5min,取出后,用3ml完全培養(yǎng)基中和,然后300-400xg 離心3min。吸棄上清液。
3. 加完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,按照所需量進(jìn)行傳代。
【儲(chǔ)存條件及保質(zhì)期】
應(yīng)貯存在-10~-20℃,有效期為18個(gè)月。開(kāi)封后存放4℃,注意避光,1周內(nèi)使用。不建議反復(fù)凍融。
【注意事項(xiàng)】
1. 本品僅用于科研,不用于臨床診斷和治療,嚴(yán)禁內(nèi)服,不能用嘴吸液。
2. 試劑包裝如有破損或滴漏,嚴(yán)禁使用。
3. 操作過(guò)程應(yīng)避免污染。
4. 操作人員萬(wàn)一與皮膚、粘膜接觸,請(qǐng)立即用自來(lái)水沖洗。
5. 禁止使用超出規(guī)定有效期的產(chǎn)品。
【聲明】
僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。