Human DiI-LDL (Human DiI-Low Density Lipoprotein)

紅色熒光標(biāo)記人源低密度脂蛋白

搜索關(guān)鍵詞：

HDL；LDL；DiI-LDL；氧化修飾Ox-LDL；乙?；揎?span>Ac-LDL；LDL receptor LDL受體；Cholesterol膽固醇；Cholesteryl ester (CE)膽固醇酯 ；Triglyceride (TG)甘油三酯；Cardiovascular diseases心血管疾病；Atherosclerosis (AS)動(dòng)脈粥樣硬化； 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

Human DiI-LDL (Human DiI-Low Density Lipoprotein)紅色熒光標(biāo)記人源低密度脂蛋白

想了解更多脂蛋白產(chǎn)品的背景知識(shí)，可見NoninBio整理的技術(shù)文章：脂蛋白類型與作用機(jī)理。

想了解更多脂蛋白產(chǎn)品，可見NoninBio整理的產(chǎn)品專題：脂蛋白產(chǎn)品專題。

產(chǎn)品訂購(gòu)：

溫馨提示：由于脂蛋白的保存周期比較短，約6周。本司一般都是接到訂單后再生產(chǎn)，從而保證客戶拿到最長(zhǎng)效期的產(chǎn)品。所以，我們貨期至少要2天以上。

基本描述：

低密度脂蛋白（Low Density Lipoprotein，簡(jiǎn)稱為LDL）是血液中五種常見脂蛋白之一，由極低密度脂蛋白（VLDL）通過脂蛋白脂肪酶（LPL）的作用使其喪失部分甘油三酯轉(zhuǎn)化而來(lái)。LDL是主要的膽固醇和膽固醇酯轉(zhuǎn)運(yùn)體，占血漿脂蛋白總量的一半以上。LDL通過受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用被肝臟和其他組織吸收。LDL受體的胞漿結(jié)構(gòu)域促進(jìn)衣被小窩（膜上富集受體區(qū)域）的形成，而受體的配基結(jié)構(gòu)域可識(shí)別LDL的apo-B100，進(jìn)而引起披網(wǎng)格蛋白小泡產(chǎn)生。ATP依賴的質(zhì)子泵降低小泡內(nèi)環(huán)境pH，引起LDL與受體解離，一旦喪失連接到溶酶體的披網(wǎng)格蛋白小泡，導(dǎo)致多肽和膽固醇酯的酶水解發(fā)生。之后LDL受體重新循環(huán)到細(xì)胞膜。研究顯示胰島素、三碘甲狀腺原氨酸（T3）和地塞米松都能參與調(diào)控LDL受體介導(dǎo)的內(nèi)吞。LDL作為一個(gè)大蛋白（Mw 3500kDa），直徑25.8nm，由約20-25%蛋白和75-80%脂質(zhì)構(gòu)成。其中脂質(zhì)部分由9%游離膽固醇、62%膽固醇酯、20-24%磷脂和5%甘油三酯組成。

本品是紅色熒光探針DiI（1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate）標(biāo)記的人源LDL（Human LDL），用來(lái)觀察培養(yǎng)細(xì)胞的LDL結(jié)合位點(diǎn)，或篩選LDL受體表達(dá)缺陷型的細(xì)胞突變株。也可通過流式細(xì)胞術(shù)評(píng)估細(xì)胞受體水平或檢測(cè)組織的受體水平。DiI-LDL是細(xì)胞內(nèi)吞研究的極好標(biāo)記物。通過納米顆粒的片段穿透進(jìn)入細(xì)胞膜，用來(lái)分離和培養(yǎng)臍帶血來(lái)源的造血干細(xì)胞。也能將脂肪和膽固醇通過血液流動(dòng)運(yùn)輸?shù)饺怼１酒窞闊o(wú)菌包裝，可用PBS磷酸鹽緩沖液或細(xì)胞培養(yǎng)基直接稀釋使用即可。

產(chǎn)品特性：

1. 濃度：0.8-4.0 mg/ml
2. 外觀：乳狀液體
3. 緩沖液組分：PBS（不含EDTA），pH 7.4

4. 吸光度比例：Dil/Protein=555nm/275nm=1.30

保存與運(yùn)輸方法：

保存：2-8℃避光保存，6周有效。不可凍存！操作時(shí)注意無(wú)菌操作！

運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。

注意事項(xiàng)：

1. 本品的稀釋工作液極不穩(wěn)定，建議現(xiàn)配現(xiàn)用； 

2. 本品長(zhǎng)期貯存可能會(huì)有沉淀析出，屬于正?，F(xiàn)象，低速離心2 min去除沉淀后使用即可；

3. LDL與LDL受體的結(jié)合需要Ca2+和Mn2+的參與，過量EDTA的存在會(huì)抑制其結(jié)合；

4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

操作步驟：

1. 無(wú)菌條件下，將Human DiI-LDL用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋至20-40 μg/ml。

2. 加入活細(xì)胞內(nèi)，37℃培養(yǎng)3-6小時(shí)。

3. 孵育結(jié)束，吸去含Human DiI-LDL的培養(yǎng)基，并用無(wú)探針的培養(yǎng)基洗幾次。

4. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

a）熒光顯微鏡觀察

采用標(biāo)準(zhǔn)的羅丹明激發(fā)：發(fā)射濾光片（或建議使用波長(zhǎng)為：Ex/Em=549nm/565nm）；若需要請(qǐng)使用含3%甲醛的PBS進(jìn)行固定，切勿使用甲醇或丙酮固定，因Dil易溶于有機(jī)溶劑。【注】需設(shè)陽(yáng)性細(xì)胞以做對(duì)照。

b）流式細(xì)胞分選

胰蛋白酶處理細(xì)胞或者加入EDTA制成單細(xì)胞懸液，選用合適的已標(biāo)記純化細(xì)胞用作陰性和陽(yáng)性對(duì)照，從而進(jìn)行流式分選設(shè)門（gate）。（建議使用波長(zhǎng)為Ex：488/514/549nm；Em：565nm）。

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注意事項(xiàng)：

為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。